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活細胞成像:ASAP1直接影響細胞遷移機制

  

ibidi微光刻照射系統 76000 

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貨號

品名

描述

規格

76000

ibidi微光刻照射系統

ibidi Micro Illumination System: ibidi Micro Illumination System,   External Power Supply, Mask Holder, Slide Holder, Dish Holder, Demo mask

1套

 

ibidi微光刻照射系統(ibidi Micro Illumination System)

一站式微加工紫外光照射平臺

? 緊湊型臺式系統:可直接配合蓋玻片腔室(如μ-Slides和μ-Dishes)使用。

? 兼容濕實驗室環境:無需潔凈室。

? 用戶友好且通用:適用于各類微結構制備應用。

 

應用

ibidi微光刻照射系統是一款緊湊、易用的臺式平臺,將光誘導微加工技術帶入日常實驗室,徹底擺脫了對潔凈室的依賴。該系統兼容μ-Slides和μ-Dishes等蓋玻片載具,支持包括光圖案化 (Photopatterning)水凝膠微結構制備光點擊化學在內的廣泛2D和3D實驗方法。用戶可以精確控制細胞貼壁、遷移和組織形成的時間與空間位置,從而構建出具有生理相關性的體外微生理模型。

微圖案化(Micropatterning)

? 光圖案化:高精度表面圖案可引導細胞行為。通過空間受控的表面功能化或蛋白圖案,定義細胞的貼壁與遷移行為。

? 光誘導創傷:在匯合單層細胞中光誘導生成無細胞區,用于傷口愈合及細胞遷移研究。

? 光點擊化學:實現化學反應的空間與時間控制。

微流體(Microfluidics)

? 在ibidi通道載玻片(Channel-Slides)中制備基于水凝膠的微流控器件,實現可灌流的微通道、分叉結構及流速限制。

? 構建可引導灌流、機械刺激及化學梯度的流體系統,助力芯片實驗室(lab-on-a-chip)和器官芯片(organ-on-a-chip)平臺的研究(例如配合組織工程微流控載玻片(μ-Slide Tissue Engineering)使用)。

微結構制備(Microstructuring)

? 采用正性或負性光刻膠的光刻(Photolithography)軟光刻(Soft lithography)技術。

? 對光交聯水凝膠和生物墨水(如:甲基丙烯酸明膠 (GelMA)、膠原蛋白、透明質酸或PEG-DA、PEG-NB)進行光聚合,以構建特定的2D/3D微架構。

? 利用365 nm光引發劑(如:Irgacure, LAP)對塊狀材料或表面進行光誘導結構化

規格

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技術特點

倒置式紫外光照射

? 配備高準直性的365 nm LED,提供大面積均勻的紫外光照射區域,實現清晰的圖案轉移。

? 光線從樣品下方進行紫外照射,非常適合與蓋玻片底部的實驗器皿(如μ-Slides和μ-Dishes)使用。

 

緊湊、即用型且靈活

? 占地面積小的臺式系統——無需任何外部設備或基礎設施。

? 直觀易用的操作——無需安裝任何軟件或連接電腦界面。

? 靈活的應用——適用于各種多功能的微結構制備。


光罩兼容性

? 支持標準的3英寸光罩(photomasks),適用于各種圖案化應用。

集成安全蓋

? 配備安全蓋和安全鎖定機制,確保操作安全。

兼容濕實驗室環境

? 專為在標準實驗室臺面使用而設計——無需潔凈室。

可選附件與模板

? 可選下壓架 (Downholders): 最大限度縮小光罩與樣品之間的間隙,從而獲得最佳的分辨率和圖案轉移效果。

? 可選孔板插片 (Well Inserts): 減少開放式μ-Slides的樣品體積并降低彎液面效應,提高圖案化的一致性。

? 提供適用于ibidi μ-Slides和μ-Dishes的即用型光罩模板。

配套演示光罩,輕松起步

? ibidi微光刻照射系統隨附一張演示光罩(photomasks),方便您針對具體的實驗應用進行簡單的概念驗證(proof-of-concept)實驗。

 

微光刻照射系統的工作原理

什么是ibidi微光刻照射系統?

 微光刻照射系統利用高度準性的紫外光(365 nm)來引發光敏化學反應,從而實現材料在微米尺度上的精確結構化與圖案化。

 

該系統的技術配置是怎樣的? 

該系統采用倒置式配置:紫外光從下方穿過光罩(Photomask)投射到樣品(如μ-Slides或μ-Dishes)上,實現空間受控的聚合、交聯或表面功能化。



這是個動態圖

光誘導化學的原理是什么? 

紫外光(365 nm)被用于在各種物理、化學和生物應用中引發化學反應。通過使用光罩,可以在特定區域阻擋光線,從而限制化學反應僅在需要的地方發生。對于表面結合反應,此過程可創建二維(2D)圖案;而對于塊狀材料(如可光交聯的水凝膠)中的反應,則可形成三維(3D)結構。


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紫外誘導化學反應的操作流程是怎樣的?

 ibidi微光刻照射系統通過幾個簡單的步驟簡化了微加工過程:

1. 首先準備好實驗器皿;

2. 插入光罩并將實驗器皿放入系統中,啟動照射過程;

根據需要對樣品進行后續處理(如清洗、包被或其他精加工)。 您的定制微結構表面現已準備就緒,可以投入使用。

如何使用微光刻照射系統

1. 放入光罩與光罩支架 

將標準3英寸光罩放入光罩支架中,然后將其插入儀器內。


2. 將樣品放置在光罩上并開始曝光 

靈活的定位方式允許您將樣品直接放置在光罩上。合上儀器蓋后,根據您的特定需求設置曝光參數,即可啟動曝光過程。

3. 可選:使用μ-Slides和μ-Dishes定位引導 

使用μ-Dish和μ-Slide專用支架,可以引導樣品放置,從而在光罩上實現快速、準確且可重復的定位。


4. 可選:使用下壓架(Downholders)最小化間隙 

針對μ-Slides,可以使用專用的下壓架配合儀器內置的緊固件,將樣品輕柔地壓在光罩上。這種組合方式可以減小樣品與光罩之間的空氣間隙,從而獲得最佳的曝光效果。

 

注:μ-Slide專用下壓架屬于可選附件,需另行購買。請參考下表獲取產品貨號及更多信息。

 

5. 可選:使用孔板插片(Well Inserts)減少體積并消除彎液面效應 

針對μ-Slide的專用孔板插片可顯著減少開放式孔(μ-Slide   2、4和8孔載玻片)中的樣品體積并消除彎液面現象。這有助于節約珍貴的試劑,并最大程度地減少因彎液面曲率導致的潛在偽影。

 

注:孔板插片屬于可選附件,需另行購買。請參考下表獲取產品貨號及更多信息。



 

微光刻照射系統有哪些優勢?
ibidi微光刻照射系統將微加工技術帶入了每一個實驗室——既經濟又易于獲取。它填補了3D打印與昂貴的潔凈室光刻機之間的空白,能夠為各類細胞培養實驗快速制備樣本。因此,ibidi微光刻照射系統具有以下特點:

? 高效性 – 樣本制備快速且經濟,設置流程極簡。

? 多功能性 – 365 nm紫外光支持廣泛的光圖案化和微加工應用。

? 靈活性 – 緊湊的臺式系統,,適合在細胞培養室、濕實驗室甚至超凈工作臺內使用。

? 易用性 – 操作簡單,曝光時間和強度均可調節——無需任何軟件或編程

? 可重復性 – 提供高精度、均勻的曝光,確保實驗結果一致可靠。

 

應用實例

基于水凝膠的微流體技術

這是個動態圖

通道內通道結構:利用ibidi微光刻照射系統及光交聯PEG-降冰片烯(PEG-NB)水凝膠,在μ-Slide I 0.4 Luer中制備而成。通過注入藍色食用色素,可清晰觀察到特斯拉閥(Tesla valve)形狀的水凝膠通道。


流體障礙物:利用ibidi微光刻照射系統在GelMA水凝膠中制備出流體障礙物。通過對梯形障礙物進行交聯并接種人臍靜脈內皮細胞(HUVEC),模擬了帶有流道收縮的血管模型。(完整方案請參考“實驗應用”欄目中的文檔Application Note 74)

 

用于定義細胞貼壁的微圖案化

微圖案化實驗: 在帶有PLL-PEG鈍化的μ-Dish 35 mm (high ibiTreat)中使用ibidi微光刻照射系統創建。圖案為直徑 200 μm、間距1500 μm的圓形,并使用熒光標記纖連蛋白(HiLyte 647,紅色)進行可視化。左圖:μ-Dish整個生長區域概覽。中圖:圖案化表面的細節視圖。右圖:接種在圖案上的MDA-MB-231細胞,在接種后2小時內顯示出對特定幾何形狀的精準貼壁。(完整方案請參考“實驗應用”欄目中的文檔Application Note 73)

 

 

 

微加工(Microfabrication)                           光誘導細胞遷移(光學傷口愈合實驗)

SU-8光刻膠母版:使用ibidi微光刻照射系統創建的帶有結構化SU-8光刻膠層的3英寸硅晶圓片掃描電子顯微鏡(SEM)圖像,作為微觀結構的PDMS母模。黃色標注表示這些結構的直徑和中心間距,藍色標注則標示了它們的長寬比。(完整方案請參考“實驗應用”欄目中的文檔Application Note 75)


這是個動態圖

內皮細胞遷移:在μ-Slide VI 0.4 中,內皮細胞(HUVECs)在10 dyn/cm2的剪切應力下培養3天,隨后通過ibidi微光照射系統進行紫外線照射,制造出一條450 μm寬的“光學創傷”區域。恢復灌流后,通過10小時的延時攝影觀察到細胞從兩側向中心遷移并閉合缺口,最終恢復為單層匯合狀態。(完整方案請參考“實驗應用”欄目中的文檔Application   Note 76)

 

光誘導細胞遷移(光學傷口愈合實驗)


大鼠成纖維細胞遷移:對大鼠成纖維細胞進行“光學創傷”處理。通過ibidi微光照射系統對200 μm的特定區域進行光照,導致該區域活細胞被去除。在24小時內,遷移的細胞重新填滿了受損區域,并形成了新的匯合單層。(完整方案請參考“實驗應用”欄目中的文檔Application Note 76)

 

用于球狀體(Spheroid)生成的微圖案化               通道載玻片中的微加工

這是個動態圖

NIH-3T3細胞球形成: 細胞接種于μ-Slide VI 0.4通道內200 μm的RGD圖案上,在40小時內形成球狀體。這些圖案均由ibidi微光刻照射系統生成。(完整方案請參考“實驗應用”欄目中的文檔Application   Note 72)


水凝膠微加工:利用ibidi微光照射系統,直接在μ-Slide VI 0.4中將含有可剪切多肽序列的PEG-NB水凝膠進行交聯加工。圖中為偽彩色顯示(原凝膠顏色為黃色,此處顯示為粉色)。(更多信息請參閱“Self-organized homogenization of flow networks”)。圖片來自Charlott Leu, Soft Matter Physics, LMU, Munich.

 

如何制作您自己的光罩 (Photomask)

借助微光刻照射系統和您自制的光罩,您可以創建專為您的科研量身定制的精確2D和3D微環境。它使您能夠在預期的位置以預期的方式,實現空間受控的聚合、交聯或表面功能化。

 

1. 下載合適的模板。(請在“實驗應用”欄目下方的適用于μ-Slides和μ-Dishes的光罩模板處下載模板文件。)

2.   設計階段:使用掩模版布局軟件(如LayoutEditor、KLayout或類似工具)進行設計。如需指導,請參考實驗應用”欄目中的文檔Application   Note 81: Photomask Layout Creation for the ibidi Micro Illumination System   (PDF),其中提供了使用KLayout的分步操作流程

3.   訂購階段:按照說明書中提供的規格,向您選擇的供應商訂購光掩模。

 

資源輔助:ibidi提供模板文件以幫助您創建自己的光罩設計。這些.GDS文件包含了所有必要的圖層,涵蓋了光罩布局以及μ-Slide的有效孔板或通道區域。


請在“實驗應用”欄目下方的適用于μ-Slides和μ-Dishes的光罩模板處下載模板文件。

 

ibidi演示光罩的布局

隨系統提供的μ-Slide 8 Well high八孔高壁腔室載玻片演示光罩的幾何形狀:cir = 圓形,sqr = 正方形,lin = 線條,pit = 間距。所有數值單位均為微米(μm)。

1
  ibidi logo

2
  cir2000, pit3000 and cir500, pit1000

3
  cir200, pit600 and cir100, pit300

4
  sqr30, pit75 and sqr10, pit50

5
  ibidi Happy cells

6
  lin2000, pit2500 and lin500, pit850

7
  lin200, pit520 and lin100, pit260

8
  lin30, pit75 and lin10, pit50

 

配件

可選配件

 

下壓架(Downholders)

貨號

產品名稱

適用范圍

76020

下壓架A

適用于μ-Slide 1, 2, 4和8 Well high(需配合μ-Slide蓋子使用

76021

下壓架B

適用于μ-Slide 8 Well, 18 Well, 2 Well Co-Culture, VI 0.4,     VI 0.5 Glass Bottom, VI 0.1, III 3in1(需配合μ-Slide蓋子使用)

76022

下壓架C

適用于μ-Slide I Luer(需配合μ-Slide蓋子使用)

76023

下壓架D

適用于μ-Slide Spheroid Perfusion, III 3D Perfusion, Tissue Engineering

76024

下壓架E

適用于μ-Slide Chemotaxis(需配合μ-Slide蓋子使用)

76025

下壓架F, 用于孔板插片(Well Inserts)

配合孔板插片使用,無需μ-Slide蓋子

76040

μ-Slide 2     Well孔板用孔板插片

PTFE材質,用于減少體積和彎液面效應,非滅菌

76041

μ-Slide 4     Well孔板用孔板插片

PTFE材質,用于減少體積和彎液面效應,非滅菌

76042

μ-Slide 8     Well high孔板用孔板插片

PTFE材質,用于減少體積和彎液面效應,非滅菌



下壓架 (Downholders):下壓架通過減小光罩表面與μ-Slide之間的距離,實現近距離紫外曝光,從而確保最佳的實驗結果。這些μ-Slide專用下壓架屬于可選附件,需另行購買。請查閱上表獲取對應的產品貨號。

 

這是個動態圖

 

孔板插片(Well Inserts):μ-Slide專用孔板插片可減少開放式孔板(μ-Slide 2, 4, 8 Well high)的體積并減少彎液面的形成。這些插片有助于節省珍貴的試劑,并最大程度地減少由彎液面效應引起的潛在偽影。孔板插片屬于可選附件,需另行購買。請查閱上表獲取對應的產品貨號。

 

 

分辨率與建議特征尺寸

理論上,在理想條件下,該系統的衍射極限標稱分辨率為2 μm。所謂“理想條件”是指:光罩與化學反應面直接接觸、化學反應層極薄,且化學反應瞬時完成且無擴散現象。但在實際實驗設置中,為了獲得更穩定的結果,我們建議設計的特征尺寸>10 μm


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